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公 司:西安www.dafa股份有限公司
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证券部:(86 29)83399735 83399736
证券部传真:(86 29)83399678
蓝色高流速琼脂大发国际网址    

蓝色高流速琼脂大发国际网址(Blue Bio-Sep 6FF)
产品说明书

  蓝色高流速琼脂大发国际网址是将蓝色染料F3 GA键合在6FF琼脂大发国际网址上形成的一种可利用基团亲和作用来实现目标产品纯化分离的亲和色谱大发dafa888。用于生物大分子如白蛋白、核苷酸辅助的酶、干扰素和凝血因子等的纯化分离。
  
1.外观:本品为蓝色球状凝胶,无嗅、无味、无肉眼可见杂质。
  
2.理化指标
  
项 目
  指 标
  配 基 F3GA蓝色染料
  基 质 6% 交联高流速琼脂糖
  形状 球形
  粒径 50~160 μm
  蛋白质吸附容量(HSA)18mg/ml
  最高流速(25℃) 700 cm/h*
  耐 压 0.3 MPa
  耐 热 pH7水中120℃20min
  工作温度 4~40℃ pH适用范围 3~13 (短时间);4~12(长时间)
  化学稳定性 以下溶液中稳定;
  1mol/L NaOH;70%EtOH;;
  8mol/L尿素;3 mol/L(NH4)2SO4
  *柱子:内径16mm、柱长30cm。柱床高5cm,25℃, 流动相为0.1mol/LNaCl。
  3. 包装
  产品以聚胺酯瓶密封包装,外贴标签,注明“品名、体积、颗粒大小、保质期、批号、生产日期、生产单位及地址” 等内容。所选用的包装应有利于保证产品质量、方便运输和贮存。
  4. 运输
  运输中应避免日晒、雨淋、重压,严禁与有毒、有害物品混运。
  5. 贮存
  产品应密封贮存在4℃~8℃(保存溶液为20% 乙醇+0.1mol/L KH2PO4,pH8.0),通风、干燥、清洁的地方。不能冷冻。 用过的柱子贮存在4℃(20% 乙醇+0.1mol/L KH2PO4,pH8.0)。
  6.保质期:暂定5年。
  7.应用
  蓝色高流速琼脂大发国际网址是一种亲和色谱大发dafa888,利用样品中组分与配基亲和性的不同进行分离。用于用于生物大分子如白蛋白、干扰素和凝血因子等的纯化分离。
  下面简要介绍大发dafa888的使用过程。
  7.1 装柱
  ⑴让所有的材料和试剂达到室温。配制初始缓冲液(平衡液)和洗脱缓冲液。 如样品为白蛋白,使用的缓冲液如下: 初始缓冲液(平衡液):0.05mol/ L K2HPO4,pH5~7(pH不同,吸附量不同); 洗脱缓冲液:0.05mol/LKH2PO4+1.5mol/ L KCl,pH7.0。
  ⑵根据柱子大小取所需量的凝胶,清洗掉20%乙醇,抽干,用初始缓冲液(按凝胶:缓冲液=3:1的比例)配成匀浆。匀浆作脱气处理。
  ⑶将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位(液面略高于滤膜),务必使底端无气泡。
  ⑷ 用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内,注意勿使产生气泡。打开柱子出液口,使凝胶在柱内自由沉降,连结好柱子顶端柱头。
  ⑸ 打开蠕动泵,让缓冲液用使用时流速的1.33倍的流速流过,使柱床稳定。用2~3倍柱体积的缓冲液平衡柱子。
  7.2平衡
  让平衡缓冲液以一定流速流过柱子,到流出液电导和pH不变。
  7.3上样
  ⑴样品用平衡液配制,浑浊的样品要离心和过滤后上样。
  ⑵一般情况是让目标产品结合在柱子上,用平衡液洗去杂质。
  7.4洗脱
  再选择一种洗脱液洗下目标产品。
  7.5再生
  一般用高盐浓度的洗脱缓冲液洗,洗10倍以上柱体积,接着用结合蛋白的平衡液洗到平衡,可再次使用。 若有失活蛋白质或脂类物质在再生时洗不掉,可用在位清洗(CIP)除去。
  7.6 在位清洗
  ⑴对沉淀蛋白,可用4倍柱体积0.1mol/L NaOH 低流速洗脱,接着用4倍柱体积2 mol/L KSCN洗涤,马上用5倍柱体积pH8.0的初始缓冲溶液洗涤。
  ⑶ 对强结合的蛋白、脂类等,用4~10倍柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗,但要注意有机溶剂的浓度以梯度的方式逐渐增加,否则容易产生气泡。再马上用5倍柱体积pH8.0的缓冲溶液洗涤。
  7.7注意
  在装柱、使用和保存柱子的时候,要避免柱子流干,气泡进入。
  7.8灭菌
  置大发dafa888于高压灭菌锅中120℃下20分钟。

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